WB：code no. M186-3、PM036
IP：code no. M152-3、PM036
IC：code no. M152-3、PM036
FCM：code no. M152-3、PM036
IHC：code no. PM036
冰冻切片能染色吗？
我们公司没有研究过在冰冻切片中使用。能保证在石蜡包埋方法中使用。
哪个组织染色（IHC）固定的方法好？
请使用10%福尔马林溶液 （福尔马林量3.7%）或4% PFA/PBS。
哪个细胞染色（IC）固定的方法好？
使用4% PFA/PBS。不推荐甲醇和丙酮固定等。
想进行细胞染色，需要注意哪些要点？
膜通透处理使用Digitonin (Sigma, D141)。溶液使用PBS（配置 最终浓度100 μg/mL）。不推荐使用Triton X-100进行膜通透处理。
关于WB检测出的LC3-I和LC3-II条带的解释，有介绍吗?
请参照以下的论文。关于LC3的WB数据的解释，有详细的解说。
Mizushima N, Yoshimori T. How to interpret LC3 immunoblotting. Autophagy. 3(6): 542-545, 2007 PubMed:17611390
Western Blotting能不能检测出LC3的条带？
请按照数据表确认以下几点。
●请使用含有SDS的样品配置缓冲液。推荐使用SDS-PAGE sample buffer (Laemmli's sample buffer)。
●使用单克隆抗体检测时，封闭后需要清洗。另外，此时使用0.05% Tween-20/PBS清洗（5分钟×3次），会发现LC3-II的信号增强。
● 作为WB的阳性对照，是HA标签融合重组蛋白质LC3（code no.PM036-P）。该产品可检测抗HA标签抗体和LC3抗体。由于HA标签融合，所以能比原来LC3检测出更粗的条带。
Western Blotting检测LC3时使用多大的凝胶浓度合适？
推荐15%。如果是10%， LC3-I和LC3-II的条带较近，识别困难。
怎样进行饥饿诱导比较好？
NRK细胞培养，将培养基转换成Hank's Balanced Salt Solution（无血清），培育2～4小时诱导饥饿状态。无血清的DMEM（Dulbecco's modified Eagle's medium）也能诱导，但是由于含有氨基酸，诱导较弱。 另外，根据细胞的种类不同，最佳条件可能多样，所以请充分研究所使用的细胞的条件。
